Análise dos indicadores da qualidade do leite estocado e vigilância epidemiológica, presença de genes de toxinas e resistoma de Staphylococcus aureus isolados de mastite bovina

Resumo: A mastite é uma das principais doenças que afetam o gado leiteiro, gerando alterações na produção e composição do leite, com prejuízos econômicos significativos para o setor. Apesar de multifatorial, os principais causadores são os microrganismos e, dentre esses agentes, Staphylococcus aureus é o principal patógeno associado à essa doença. Diversos fatores de virulência, como formação de biofilme e produção de toxinas, contribuem para a persistência e agravamento da infecção no animal. A terapia antimicrobiana empregada para o tratamento da mastite engloba diversos antimicrobianos, incluindo aqueles criticamente importantes para a saúde humana, segundo a Organização Mundial da Saúde. Diversos trabalhos, no Brasil e no mundo, têm descrito S. aureus resistentes aos antimicrobianos em mastite bovina, incluindo isolados resistentes à meticilina (MRSA). A tênue relação entre os bovinos leiteiros e os humanos, incluindo os ordenhadores, toda cadeia produtiva e consumidores finais, justifica a importância de uma abordagem de saúde única (one health) para este problema tão complexo. Dentro deste contexto, o objetivo deste estudo é avaliar os indicadores de qualidade do leite cru estocados em tanques de refrigeração e caracterizar a diversidade genética, resistência aos antimicrobianos e detectar genes codificadores de toxinas em isolados de S. aureus causadores de mastite clínica e subclínica em bovinos de propriedades rurais do Sul do Espírito Santo (ES). Serão realizadas visitas quinzenais em 40 propriedades de bovinos de leite localizadas no município de Alegre. No momento da visita, serão realizadas as avaliações clínicas dos quartos mamários de todas as vacas em lactação, com posterior análise da presença da mastite, por meio do teste da Caneca de Fundo Preto e do Califórnia Mastitis Test (CMT®). Serão coletadas amostras de leite nos bovinos com mastite para isolamento e identificação de S. aureus. Será avaliado, pelo método de difusão a partir do disco, o perfil de susceptibilidade dessas amostras frente a 14 antimicrobianos de importância humana e veterinária. A capacidade de produção de biofilme será verificada in vitro utilizando placas de poliestireno. Serão pesquisados, por reação em cadeia da polimerase (PCR), o tipo de cassete cromossômico mec (SCCmec) nas amostras resistentes à oxacilina e os genes relacionados à produção de diferentes toxinas, destacadamente as enterotoxinas estafilocócicas. A relação genética entre as amostras será verificada pela fragmentação do DNA cromossômico utilizando enzima de restrição e posterior separação por eletroforese em campo pulsado (PFGE). Amostras dos principais genótipos encontrados por PFGE serão submetidas à tipagem de sequência multilocus (MLST) para determinação do “sequence type” e comparação com as amostras, tanto de origem animal quanto humana, existentes no banco de dados do MLST. Adicionalmente, contemplando a segunda parte do trabalho, serão coletadas amostras de leites crus armazenados em tanques de refrigeração de cada propriedade rural incluída no estudo para determinação da qualidade do leite por meio da contagem de bactérias psicrotróficas, coliformes totais e termotolerantes, células somáticas e da composição centesimal. Com o desenvolvimento deste projeto de pesquisa espera-se fornecer subsídios para a melhor compreensão das infecções por S. aureus no gado leiteiro na região. Dado o impacto econômico e na saúde animal da mastite bovina, é relevante compreender a resistência, virulência e epidemiologia desta bactéria e otimizar a implementação e vigilância de boas práticas de segurança na ordenha do gado leiteiro e no armazenamento do leite. Com a implementação dessas melhorias será possível garantir um produto adequado com qualidade e inocuidade para o consumidor e melhorar economicamente a situação dos produtores.

Data de início: 01/10/2023
Prazo (meses): 48

Participantes:

Papel	Nome
Colaborador	JULIANNE SOARES JARDIM LACERDA BATISTA
Coordenador	RICARDO PINTO SCHUENCK